本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)水平。用纯化的犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)，再与HRP 标记的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)浓度。
犬抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒注意事项：
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。加样时间
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
