ELISA试剂盒操作流程:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
ELISA试剂盒注意事项:
◆标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。